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氨基酸原料制備細(xì)節(jié)把控好助手,柱后衍生儀—茚三酮氨基酸分析法


氨基酸 原料制備

氨基酸原料的制備分為集中方法:微生物發(fā)酵法、化學(xué)合成法、化學(xué)合成 - 酶法、蛋白質(zhì)水解法;其中絕大部分生產(chǎn)商都采用微生物發(fā)酵法和蛋白質(zhì)水解法來制備氨基酸。


 


主要是因?yàn)樯鲜龇椒兌雀撸磻?yīng)條件溫和,可有效的防止降解,提高氨基酸的產(chǎn)量,且能源消耗及環(huán)境污染均在可控范圍內(nèi)。


由于越來越多的氨基酸生產(chǎn)商使用微生物發(fā)酵法制備氨基酸,在制備的過程中,補(bǔ)料是常用的操作模式,分為初試和批量進(jìn)料,初試用于少量進(jìn)料,確定進(jìn)料曲線后,再批量進(jìn)行相關(guān)物料添加。通過該方法可以更好的提高氨基酸的產(chǎn)率和產(chǎn)量,在此過程中對(duì)氨基酸定性定量的測(cè)試,于發(fā)酵過程中原料的補(bǔ)充和條件的控制是重要的一環(huán)。(見圖1)


 

1:發(fā)酵法制備氨基酸流程



Part.1 柱后衍生—茚三酮法

此外,在原料制備完成后的成品檢測(cè)及報(bào)告出具過程中,柱后衍生亦可以完成氨基酸的精準(zhǔn)定性及定量測(cè)試,而柱后衍生—茚三酮法在氨基酸的分析中一直是主力測(cè)試方案,包括氨基酸分析儀亦采用的柱后衍生-茚三酮的原理對(duì)氨基酸進(jìn)行分析,該方法通過柱后衍生系統(tǒng),將衍生試劑與色譜柱上分離出來的化合物在反應(yīng)器中進(jìn)行衍生化反應(yīng)后再進(jìn)入到檢測(cè)器中進(jìn)行定性,定量測(cè)試(見圖2)

 

 

2:柱后衍生連接示意圖



Part.2 柱后衍生—茚三酮法其他應(yīng)用

除上面提到的發(fā)酵法制備氨基酸可用柱后衍生儀—茚三酮法進(jìn)行測(cè)試外,下述樣本亦可用該方法進(jìn)行測(cè)試:

●   生物培養(yǎng)基中氨基酸分析;

●   多肽、抗體中氨基酸分析;

●   生理體液(血液、尿液等)中的氨基酸分析;

●   食品中的氨基酸(?;撬幔┓治?;

●   飼料中的氨基酸分析;

●   其他氨基酸相關(guān)的課題研究;


且柱后衍生的應(yīng)用亦可擴(kuò)展至:

●   抗生素分析;

●   伏格列波糖;

●   毒素;

●   藥物研究。



Part.3 Pickering柱后衍生儀

 


Onyx PCX

Pickering柱后衍生儀,作為四十年的柱后衍生品牌,專注于柱后衍生領(lǐng)域,打造了專為氨基酸分析而生的Onyx PCX,該機(jī)型有專門為氨基酸分析涉及的梯度升溫柱溫箱,梯度溫度配合液相梯度,可以將氨基酸達(dá)到盡可能大的分離效果,其中亮氨酸和異亮氨酸的分離度可達(dá)1.5,遠(yuǎn)超標(biāo)準(zhǔn)要求。并且Pickering可以提供完整的分析試劑包及應(yīng)用方案,很大程度節(jié)省方法優(yōu)化時(shí)間且保證結(jié)果的準(zhǔn)確度。