它值多少錢?
你有沒有計(jì)算過你濃縮的樣品的價(jià)值?
很多時(shí)候,我們一個(gè)月處理的樣品價(jià)值就遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了蒸發(fā)濃縮儀器的價(jià)值。
如果在濃縮的過程中樣品遭到污染或損失,我們就需要從頭來過,這增加的不僅是我們的金錢成本,還有時(shí)間成本。
在濃縮或干燥的過程,我們的首要任務(wù)是 確 保 你的樣品在處理的過程完好無損,而不是追求速度。
濃縮干燥過程中什么會(huì)導(dǎo)致樣品出問題?
樣品可能被損壞的主要方式有四種:
如何解決這些問題?
紫外線損害
有三種方法可以防止樣品在紫外線下暴露:
1. 第 一 個(gè)也是最沒有幫助的是不使用Coolheat?燈,這會(huì)大大延長濃縮處理的時(shí)間,因此不推薦使用;
2. 其次是把樣品裝在一個(gè)不透光的籠罩轉(zhuǎn)子里, 但樣品在這種轉(zhuǎn)子里接受不到蒸發(fā)腔里熱流,干燥速度要慢10%,所以也不推薦使用這種方法;
3. 在燈跟腔體中間加上隔紫外線的玻璃窗口,屏蔽掉燈發(fā)出的紫外線,這是直接有效的方法。
樣品過熱
在許多情況下,我們不想將樣品加熱到40-45℃以上。然而,為了快速干燥,我們 必 須 向樣品提供大量的熱能,大多數(shù)濃縮儀使用電熱絲或者紅外燈來實(shí)現(xiàn)。
當(dāng)樣品蒸干時(shí),不再有熱量從樣品中流出,這時(shí)候如果仍在不停的對(duì)樣品傳輸熱量,就會(huì)導(dǎo)致樣品溫度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于安全溫度,進(jìn)而使一些熱敏性樣品變形或失活。
我們可以從兩方面避免這個(gè)問題:
1. 在濃縮干燥的過程,要控制樣品支架的溫度一直保持在儀器設(shè)定的 最 高 溫度下,僅在安全溫度下進(jìn)行加熱;
2. 在樣品 完 全 干燥之前將停止加熱,停止對(duì)沒有溶劑存在的樣品傳輸熱量,這需要你多次實(shí)驗(yàn)去摸索樣品完 全干燥的大概時(shí)間。一旦停止加熱,剩下的溶劑就僅靠腔體剩下的余熱進(jìn)行干燥,如果溶劑是高沸點(diǎn)溶劑(如DMSO),則速度極慢。
交叉污染
交叉污染發(fā)生的原因是在濃縮過程溶劑發(fā)生了暴沸。
單一溶劑的暴沸,這樣的情況很容易避免。較具難度的是在處理混合溶劑時(shí)(例如DCM與甲醇的混合溶劑,DCM密度大沸點(diǎn)低,而甲醇密度小卻沸點(diǎn)高),如何有效避免暴沸的產(chǎn)生:
1. 可控的緩慢下降的壓力:在處理混合溶劑時(shí),緩慢可控地梯度下降壓力,可以讓底部密度大的溶劑以非常細(xì)小的氣泡緩慢沸騰升到液體表面,保 證蒸發(fā)的初期非常緩和的進(jìn)行。如果壓力變化太快,溶劑沸騰的很快,并在短時(shí)間內(nèi)形成的大量氣體,這可能會(huì)噴射出所有的溶液;
2. 高離心力:由于高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生離心力的作用,使得樣品管在運(yùn)行過程中液體底部壓力將大于表面壓力。根據(jù)沸點(diǎn)隨著壓力的降低而降低的原理,使得液體表面的沸點(diǎn)將小于底部的沸點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)證明,如果離心腔不能帶來500g的離心力,就無法阻止蒸發(fā)濃縮中的暴沸,這對(duì)濃縮儀器的要求非常高;
3. 一般建議任何樣品容器(微量滴度板或小瓶)的填充量不得超過總體積的75%;
4. 當(dāng)運(yùn)行極揮發(fā)性的溶劑(例如DCM)在開始運(yùn)行前確 保腔室冷卻。
樣品的意外蒸發(fā)
樣品的意外蒸發(fā)指的是在除了溶劑的蒸發(fā),部分易揮發(fā)的樣品也因?yàn)闇囟容^高而被蒸發(fā)升華。這不是一個(gè)常見的問題,但對(duì)于那些深受其影響的實(shí)驗(yàn)人員來說,這非常令人頭疼。
這些樣品蒸發(fā)后可能會(huì)到儀器里的其他地方(例如真空泵中),從而影響儀器的使用壽命;也可能會(huì)在相鄰的較冷的、尚未干燥的樣品中重新凝固,導(dǎo)致樣品的交叉污染。重要的是樣品的損失。
有許多方法可以防止樣品蒸發(fā)損失:
1. 調(diào)整濃縮方法設(shè)置
當(dāng)處理中沸點(diǎn)或高沸點(diǎn)溶劑(從DMF到DMSO或NMP)時(shí),我們通常會(huì)將系統(tǒng)設(shè)置在完 全真空下運(yùn)行,并將溫度設(shè)置為樣品可以不被損壞的最 高溫度,但揮發(fā)性樣品也會(huì)損失一部分。
所以我們不能將壓力設(shè)置為“完 全 真 空”并且要降低控制溫度,雖然這會(huì)讓濃縮速度變慢,但也可以減少樣品的損失,這需要我們根據(jù)具體情況來權(quán)衡調(diào)整。
2. 在樣品干燥時(shí)及時(shí)停止
預(yù)防問題比解決問題更簡單,我們可以從根源杜絕這種情況的發(fā)生。在運(yùn)行過程中,大部分揮發(fā)性樣品損失的時(shí)間是在運(yùn)行過程的最 后一段,此時(shí)溶劑已經(jīng)蒸完了,干燥的樣品上升到與樣品支架相同的溫度。
這是因?yàn)樵跊]有任何溶劑蒸汽的情況下,機(jī)器可以獲得更好的真空,且此時(shí)腔體的溫度是 最 高 的。持續(xù)的時(shí)間越長,樣品損失的越多。因此,在樣品干燥后立即停止運(yùn)行除了可以防止樣品過熱失活,也可以減少樣品的損失。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例
Maldi-Tof質(zhì)譜分析探針質(zhì)量,以確定序列和修飾是否正確
采用兩款濃縮儀用于樣品制備
Genevac HT溶劑蒸發(fā)工作站:不直接加熱、有精 準(zhǔn)的溫度控制系統(tǒng),可控制樣品的熱流
Genevac HT溶劑蒸發(fā)工作站
SF-60普通濃縮儀:直接加熱樣品、無 精 準(zhǔn)的溫度控制系統(tǒng),不可控制樣品的熱流
正常Cy5標(biāo)記的Oligo
在SF60干燥后的Cy5標(biāo)記的Oligo,已發(fā)生降解
Genevac 溶劑蒸發(fā)工作站
一臺(tái)智能高效的溶劑蒸發(fā)工作站——Genevac,可以很好符合對(duì)樣品保護(hù)的所有要求。(詳細(xì)內(nèi)容請點(diǎn)擊查看)
1、紫外線隔絕玻璃
放置在Coolheat?燈和腔室之間的標(biāo)準(zhǔn)窗玻璃可以隔絕紫外線;
2、控溫系統(tǒng)
通過SampleShield紅外探溫器及紅外燈的配合,實(shí)現(xiàn)對(duì)溫度的精 準(zhǔn)控制;
3、Dri-Pure®防暴沸功能
Genevac的技術(shù)——Dri-pure防暴沸功能可以有效杜絕暴沸的發(fā)生;
使用Dri-Pure
未使用Dri-Pure
4、智能停機(jī)
Genevac搭載全自動(dòng)控制系統(tǒng),系統(tǒng)帶有專門的溶劑蒸發(fā)方法及干燥后智能停機(jī)功能。
總結(jié)
樣品的完整離不開在我們實(shí)驗(yàn)操作的規(guī)范性、實(shí)驗(yàn)室管理等人為因素,更離不開實(shí)驗(yàn)儀器的保護(hù)機(jī)制及穩(wěn)定運(yùn)行。
如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎隨時(shí)撥打德祥科技熱線400-006-9696咨詢。
Genevac 溶劑蒸發(fā)產(chǎn)品
德祥科技
德祥集團(tuán)成立于1992年,總部位于香港特別行政區(qū)。作為科學(xué)儀器供應(yīng)商和服務(wù)商,德祥服務(wù)于大中華區(qū)和亞太地區(qū),每年都為數(shù)以千計(jì)的客戶提供全套解決方案。
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2009至2021年間,德祥先后榮獲了“最 具 影 響 力 經(jīng) 銷 商”、“年 度 最 佳 代 理 商”、“年 度 最 高 銷 售 獎(jiǎng)”等殊榮。我們始終秉承誠信經(jīng)營的理念,致力于成為優(yōu) 秀的科學(xué)儀器供應(yīng)商,為此我們從未停止前進(jìn)的腳步。我們始終相信,每 一 天都在使這個(gè)世界變得更美好!
Genevac
英國Genevac是德祥科技旗下代理品牌之一。英國Genevac公司成立于1990年,隸屬SP Scientific旗下,一直專注于研究和生產(chǎn)各種離心蒸發(fā)濃縮設(shè)備,其產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、制藥、化學(xué)、分析等領(lǐng)域。
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