在藥物的液相分析中,0.1%磷酸溶液、0.1%三氟乙酸等均是常用酸性流動(dòng)相體系,這些低pH的運(yùn)行環(huán)境對(duì)色譜柱鍵合相的牢固程度提出了相當(dāng)?shù)目简?yàn)。鍵合相發(fā)生流失后,分析方法的重現(xiàn)性將會(huì)受到影響。若是LC-MS分析,檢測(cè)器靈敏度高,還容易造成本底干擾,從而導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度的下降。
圖1:鍵合相在低pH下發(fā)生水解,鍵合相流失
Waters HSS C18色譜柱在高密度C18鍵合基礎(chǔ)上,結(jié)合了三鍵鍵合工藝,使其在低pH下耐受性更好。如圖2,在極端條件下考察時(shí),對(duì)羥基苯甲酸甲酯的保留時(shí)間損失越少,則代表鍵合相更牢固,抗流失性也更好。
圖2:HSS C18色譜柱與不同色譜柱抗流失性比較
在各國藥典方法中,硅膠基質(zhì)的C18色譜柱應(yīng)用很廣泛。在如今降本增效的大環(huán)境下,如何將原本長(zhǎng)柱方法縮短,提高工作的效率也是實(shí)驗(yàn)室分析工作人員面臨問題之一。
Waters HSS C18色譜柱正是基于此種考慮專門設(shè)計(jì),是一款能耐受更高壓力的高純硅膠C18烷基硅烷填料,粒徑從3.5/5 μm到2.5 μm再到1.8 μm,可滿足不同實(shí)驗(yàn)室的提速需求。如圖3所示,歐洲藥典螺內(nèi)酯色譜柱篩選結(jié)果顯示,HSS C18色譜柱對(duì)雜質(zhì)的分離結(jié)果與硅膠柱Sunfire C18色譜柱結(jié)果最接近,效果相對(duì)更好,且單針運(yùn)行的時(shí)間顯著縮短。
圖3:歐洲藥典-螺內(nèi)酯Sunfire C18(3.5 μm,4.6×150 mm)重現(xiàn)結(jié)果
圖4:歐洲藥典 - 螺內(nèi)酯色譜柱(1.8 μm,2.1×100 mm)篩選結(jié)果
綜上,HSS C18無論是色譜柱本身性能還是在藥典應(yīng)用中,都具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。
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